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DAPI染色液（5μg/ml）使用說明書
點(diǎn)擊下載日期：2014/4/29 9:30:16
DAPI細(xì)胞染色液(DAPIStainingSolution)是適用于常見細(xì)胞和組織細(xì)胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihydrochloride，也稱DAPIdihydrochloride，分子式為C16H15N5·2HCl，分子量為350.25。可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強(qiáng)20多倍的熒光，靈敏度高于EB。
DAPI染色常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的*大激發(fā)波長為340nm，*大發(fā)射波長為488nm，DAPI和雙鏈DNA結(jié)合后，*大激發(fā)波長為364nm，*大發(fā)射波長為454nm。本DAPI染色液可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，亦可以按照具體實(shí)驗(yàn)要求，稀釋到相應(yīng)濃度后進(jìn)行染色。一般推薦工作濃度為0.5ug～10ug/ml。
DAPI染色液組成：
DAPIStainingSolution(5μg/ml) 10ml/50ml -20℃避光
主要成分：主要由DAPI、溶劑、防腐劑等組成。
自備材料：
熒光顯微鏡
蒸餾水
微量移液
PBS或生理鹽水
DAPI染色液操作步驟（僅供參考）：
對于細(xì)胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行DAPI染色，如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的DAPI染色。對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的DAPI染色液，混勻。
室溫放置5～8min。
3.輕輕吸取DAPI細(xì)胞染色液。
4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。5.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。
染色結(jié)果：細(xì)胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
注意事項：
DAPI染色液的濃度適用于各種常規(guī)染色的需要。
熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。
為減緩熒光淬滅，可以使用抗熒光淬滅封片液。
4、避免反復(fù)凍融，否則容易失效。
5、DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。
6、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
有效期：6個月有效。
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